블로그

Jul 21, 2023

새로운 포획 및 결찰 프로브 구현

말라리아 저널 22권, 기사 번호: 21(2023) 이 기사 인용 1375 2 Altmetric Metrics 세부 정보 액세스 말라리아 제거를 위한 대량 검사 및 치료(MSAT)에는 이상적인 진단이 부족합니다.

말라리아 저널 22권, 기사 번호: 21(2023) 이 기사 인용

1375 액세스

2 알트메트릭

측정항목 세부정보

말라리아 퇴치를 위한 대량 검사 및 치료(MSAT)에는 현장에서 대상 인구에 대해 민감하고 저렴한 테스트를 수행할 수 있는 이상적인 진단 도구가 부족합니다. 이 연구에서는 CLIP-PCR(Capture and Ligation Probe-PCR)이 미얀마 라이자 시티의 현장 MSAT에서 사용될 수 있는지 여부를 평가했습니다.

0일째에는 각 참가자로부터 2개의 건조 혈액 반점을 수집했습니다. 1일차에는 작업대, 생물학적 안전 캐비닛, 냉장고, 벤치탑 진탕 인큐베이터 및 qPCR 기계를 갖춘 20m2 규모의 실험실에서 4명의 기술자가 시료 풀링과 함께 CLIP-PCR을 사용하여 다음 보건 진료소에서 모든 시료를 Plasmodium에 대해 검사했습니다. 중국과 국경을 접하고 있는 나방(Nabang) 마을. 2일째에는 모든 양성 반응을 추적 조사하고 치료했습니다.

선별된 15,038명(전체 인구의 65%) 중 204명(1.36%)이 CLIP-PCR 양성이었습니다. 이 중 188명, 14명, 2명은 Plasmodium vivax, Plasmodium falciparum 및 P. vivax/P에 감염되었습니다. 각각 열대열 믹스. 테스트 용량은 538명/일이며 비용은 US$0.92/인입니다. 현미경하 감염 비율은 64.7%였다. 모든 양성 개인은 혈액 수집 후 72시간 이내에 치료를 받았습니다.

낮은 전송 설정에서 MSAT의 CLIP-PCR을 사용하면 중국-미얀마 국경 지역의 말라리아 퇴치 노력을 지원할 수 있습니다.

말라리아에 대한 대량 검사 및 치료(MSAT)는 넓은 지리적 영역에서 전체 인구를 대상으로 검사를 실시한 후 말라리아 증상 유무에 관계없이 양성인 개인만을 치료하는 것으로 정의됩니다. 이러한 접근법은 말라리아 역학에 대한 중요한 정보를 제공하며, 이는 추가 질병 억제 노력에 유용할 수 있으며[1] 대량 약물 투여보다 대상 집단에 의해 받아들여질 가능성이 더 높습니다[2]. 더욱이, Plasmodium vivax 발병을 통제하기 위해 primaquine을 사용한 대량 예방 치료는 대상 지역 인구에서 포도당-6-인산 탈수소효소 결핍률(최대 14.8%)이 높기 때문에 위험할 수 있습니다[3]. 최근 MSAT 전략이 말라리아 제거와 관련하여 다시 주목을 받았지만, 세계보건기구(WHO)는 민감도가 높고 처리량이 높은 진단 도구가 부족하기 때문에 MSAT를 말라리아 전파를 차단하기 위한 개입 전략으로 권장하지 않았습니다. 이는 비용 효율적이고 현장 친화적인 운영 방법입니다[2, 4].

이러한 문제를 극복하기 위해 Capture and ligation probe-PCR(CLIP-PCR)이라는 96웰 플레이트 플랫폼에서 처리량이 많은 분자 분석법이 개발되어[5], 핵산 정제 및 역전사 없이 직접 말라리아 RNA 검출이 가능해졌습니다. 0.01 말라리아 기생충/μL 혈액 또는 3mm 건조 혈반(DBS)을 사용하는 경우 약 0.33 기생충/μL의 검출 한계가 있습니다[5, 8]. 이는 낮은 투과율 설정에서 PCR 기반 말라리아 스크리닝을 위해 WHO에서 권장하는 목표 검출 한계(2 기생충/μL 이하)를 충족하는 동시에 말라리아 스크리닝을 현미경 및 표준 중첩 PCR보다 쉽고 저렴하게 만듭니다[7, 8]. 이 방법에서는 혈액 샘플의 18 S rRNA 표적이 세포 용해를 통해 방출되고 일련의 특정 꼬리 프로브에 의해 샌드위치 혼성화를 통해 96웰 캡처 플레이트의 웰에 캡처됩니다. 여분의 프로브와 불순물을 제거한 후, 결합된 꼬리 프로브를 결찰하여 후속 qPCR 증폭 및 검출을 위한 단일 가닥 주형을 형성합니다[5]. 최근 CLIP-PCR의 개선된 버전인 다중 섹션 CLIP-PCR(mCLIP-PCR)이 개발되어 훨씬 단축된 분석 시간으로 Plasmodium 속 및 종 식별이 가능해졌습니다[9].

Kachin Special Region II(KSR2)는 미얀마 북부에 위치한 가난한 산악 지역으로 중국 윈난성 잉장현과 214.6km의 육지 국경을 공유하고 있습니다. 2012년 KSR2 지역 분쟁 이후 다수의 국내 실향민이 중국-미얀마 국경을 따라 이민 및 정착하여 중국(윈난성)과 미얀마 간 국경 간 말라리아 예방 및 통제 공동 활동 성과에 위험을 초래했습니다. [10,11,12,13,14]. 미얀마 KSR2에서는 말라리아 발병률이 2012년 2.1%에서 2016년 5.1%로 증가했다[15]. 또한 2016년에는 라이자시 및 인근 지역에서 P. vivax의 발생이 관찰되었으며[16], 말라리아 발생 건수는 2015년 940건에서 2016년 2080건으로 2.3배 급증했다[16]. 미얀마에서 Yingjiang 카운티로 유입된 말라리아 사례의 수는 2012년 35건[17]에서 2016년 185건[16]으로 급격히 증가하여 2020년까지 Yingjiang 카운티의 말라리아 퇴치 목표를 위태롭게 했습니다[18,19,20].